細胞平臺

一、穩轉細胞株構建服務內容:

冰球突破游戏下载 www.ojblc.icu 穩定表達細胞株(穩轉細胞株)指在細胞中持續穩定表達特定基因或干擾特定基因表達。穩轉細胞株的目的基因質粒DNA整合到細胞染色體上,使細胞長期穩定表達該基因。

在基因功能的研究中,基因是否有效轉染靶細胞,是功能研究的前提條件之一。而穩定表達細胞株則彌補了瞬時感染(或轉染)一些功能實驗中由于外源基因表達時間短的缺陷,便于長期觀察基因對于細胞功能的影響以及蛋白間相互作用。

用轉染質?;蠆《廄秩鏡姆椒ń菇ê玫暮謝虻腦靨宓既胂赴?,根據不同的基因載體中所含的抗性標志選用相應的藥物進行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎上,得到單細胞長出的陽性單克隆,繼而得到穩定轉染細胞株。常用的真核表達載體的抗性標志物有嘌呤霉素(puromycin)、潮霉素(hygromycin)和新霉素(neomycin)。

穩定細胞株服務流程:
1、載體構建:將外源基因構建到合適的載體上。
2、篩選濃度測定:以一定天數的細胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度。
3、細胞接種:轉染實驗前天接種細胞,各種細胞的平板密度依據各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉染當天細胞應達到 70%-90% 覆蓋。
4、細胞轉染:用構建好的載體轉染目的細胞。
5、抗生素篩選,多輪。 6、鑒定篩選結果,逐步建立穩定細胞株。

二、流式細胞儀服務內容:

1、快速測量、存貯、顯示細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,及細胞亞群

2、分析細胞表面標志

3. 分析細胞內抗原物質

4. 分析細胞受體

5. 分析腫瘤細胞的DNA、RNA含量

6. 分析免疫細胞的功能